検出範囲

3pg/ml-120pg/ml

使用目的

本キットは、ヒト血清、血漿及び関連液体サンプル中の信号伝達子及び転写活性子3（STAT 3）の含有量を測定するために用いられる。

じっけんげんり

本キットは二重抗体サンドイッチ法を用いて標本中のヒト信号伝導子及び転写活性子3（STAT 3）レベルを測定した。TMBはHRP酵素の触媒下で青色に変換され、酸の作用下で最終的な黄色に変換される。色の濃淡はサンプル中の信号伝導子及び転写活性化子3（STAT 3）と正の相関を示した。酵素スケールを用いて450 nm波長で吸光度（OD値）を測定し、標準曲線を用いてサンプル中のヒト信号伝導子及び転写活性子3（STAT 3）濃度を計算した。

サンプル要件

1.標本採取後は早めに抽出を行い、抽出は関連文献に従って行い、抽出後はできるだけ早く実験を行うべきである。すぐに試験を行うことができなければ、標本を-20℃に保存することができるが、繰り返し凍結融解を避けるべきである

2.NaN 3がワサビペルオキシダーゼ（HRP）活性を阻害するため、NaN 3含有試料を検出することはできない。

操作手順

1.標準品の希釈：本キットは原倍標準品1本を提供し、ユーザーは以下の図表に従って小試験管の中で希釈することができる。

2.試料添加：それぞれ空洞（空洞対照孔に試料及び酵素標準試薬を添加せず、残りの各工程の操作は同じ）、標準孔、測定対象試料孔を設置する。酵素標識被覆プレートに標準品を正確に50μl添加し、測定試料孔に試料希釈液40μlを添加した後、測定試料10μlを添加した（試料の最終希釈度は5倍）。サンプリングしてサンプルを酵素スケールプレートの穴の底に加え、できるだけ穴の壁に触れないようにして、軽く揺れて混ぜます。

3.温育：封板膜で封板した後、37℃で30分間温育した。

4.配液：30倍濃縮洗浄液を蒸留水で30倍希釈して予備用

6.酵素添加：酵素標的試薬を穴ごとに50μl添加し、空白穴を除く。

7.温育：操作は同3。

8.洗浄：操作は同5。

9.発色：穴ごとに発色剤A 50μlを添加し、発色剤B 50μlを添加し、軽く振動混合し、37℃で光を避けて10分間発色する。

10.終了：1ウェル当たり終止液50μlを添加し、反応を終了する（この時、青色は黄色に立転する）。

11.測定：空白孔をゼロに調整し、450 nm波長を順に各孔の吸光度（OD値）を測定する。測定は終止液添加後15分以内に行う。

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