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メール
2843593679@qq.com
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電話番号
13564080845
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アドレス
上海嘉定区嘉羅道路1661号24棟
上海絹科生物技術有限公司
2843593679@qq.com
13564080845
上海嘉定区嘉羅道路1661号24棟
特に注意:本製品は科学研究のためだけに使用され、人体の臨床直接検査に使用してはならない。
製品名:補酵素I NAD(H)含有量試験箱可視分光光度法
製品仕様:50管/24サンプル
検出方法:可視分光光度法
製品番号:BK-01 S 6322
製品分類:
商品紹介:
| 測定意義 補酵素I NAD(H)は動物、植物、微生物、培養細胞に広く存在し、NAD+は酵母分解(EMP)とトリカルボン酸循環(TCA)の主要な水素受容体であり、生成されたNADHは呼吸電子鎖(ETC)を介して酸素に電子を渡し、ATPを合成すると同時に、大量のROSを形成し、同時にNADHはNAD+に再生する。糖、脂質、タンパク質の3大代謝物質分解における酸化反応の大部分はこの系によって完成される。NAD(H)含有量とNADH/NAD+比の高低は、発酵分解とTCAサイクルの強弱を評価するために使用することができる。高いNAD(H)及びNADH/NAD+比は細胞呼吸の酸素消費量が高く、過酸化状態にあることを示している。また、NADH/NAD+比の上昇は、サッカリン分解及びTCAサイクルを抑制することもできる。また、NAD+分解生成物は細胞信号伝導、代謝、遺伝子発現などに対して重要な制御作用を有する。 そくていげんり それぞれ酸性とアルカリ性抽出液を用いてサンプル中のNAD+とNADHを抽出し、NADHはPMSの水素移動作用を通じて、還元酸化型チアゾールブルー(MTT)はメチルレトニウムであり、570 nmで吸光値を検出した、一方、NAD+はエタノール脱水素酵素によりNADHに還元され、さらにMTT還元法を用いて測定することができる。 持参する必要がある機器や用品 分光光度計、卓上遠心分離機、ピペット、ガラス比色皿1 mL、すり鉢、氷、蒸留水が見られる。 |
必要な機器と用品:
可視分光光度計、1 mLガラス比色皿(光径1 cm)、低温遠心分離機、ピペット、すり鉢、氷、蒸留水
四、超酸化物不均化酵素(SOD)の測定:
正式な実験の前に2つのサンプルを選んで予測定を行うことを提案して、本ロットのサンプルの情況を理解して、実験の流れを熟知して、実験を避ける
サンプルと試薬を無駄に!
1、サンプルの調製
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①組織サンプル: 約0.1 gの組織(水分が十分なサンプルは0.25 g)を採取し、1 mLの抽出液を加え、4ºCまたは氷浴で行った 均質化(または各種の一般的な均質化器を使用)。4ºC×12000 rpmで10分間遠心分離し、測定液として上清を採取した。 【注】:サンプル量を増やす場合は、組織質量(g):抽出液体積(mL)が1:5〜10の割合で抽出することができる |
②細菌/細胞サンプル: まず細菌や細胞を遠心管内に集め、遠心してから清を捨てる。約500万の細菌または細胞を1 mL添加 抽出液、超音波破砕細菌または細胞(氷浴、出力200 W、超音波3 s、間隔10 s、繰り返し30回)、 12000 rpm 4℃で10分間遠心分離し、上清を採取し、氷の上に置いて測定する。 【注】:サンプル量を増やす場合は、細菌/細胞数(10 4):抽出液(mL)は500〜1000:1の割合で抽出する。③液体サンプル:直接検査、濁っている場合は、遠心分離後に上清を取って検査する。 |

実験方法学:
一、ヘパリンの調製:
市販のヘパリン凍結乾燥粉140単位/mg、1 g瓶入り、1本あたり140000単位、0.1 gのヘパリン凍結乾燥粉を秤量し、生理食塩水5 mlを加え、2800単位/mlに配合した。50〜100μlの湿潤管壁を採取し、人の血3〜5 mlを抗凝固でき、血液は凝固しない。ネズミの血は凝固しやすいので、もっと濃いほうがいい。ヘパリン凍結乾燥粉0.1グラムを採取し、生理食塩水3 mlを加えて溶解した後、50〜100μlを採取し、マウスの血2〜4 mlを抗凝固することができる。
ヘパリン抗凝固管の製造:0.1グラムのヘパリン凍結乾燥粉を採取し、2.5 mlの生理食塩水を加える。100μl〜150μlを取ってプラスチックまたはガラス管に滴下し、管壁を湿らせ、80℃未満の小さなオーブンで(パンを焼く小さなオーブンでよい)、横方向に回転させ、5〜10分ごとに回転させ、乾燥後4℃に入れて保存し、2〜5 mlの血液を凝固させないようにすることができる。
二、血液サンプルの収集:
全血は収集した条件によって、非抗凝固と抗凝固の2種類に分けられる。同時に、非凝固分離された上層黄色の液体を血清と呼ぶ。抗凝固分離された上層黄色の液体を血漿と呼ぶ。
1、抗凝固せずに血清を収集する:収集した全血を、1〜2時間静置し、直接低速遠心分離出血清を使用または保存する。
2、抗凝固収集血漿:抗凝固全血を収集し、十分に抗凝固した後、直接低速遠心分離血漿(30分程度静置してから低速遠心分離血漿)を使用または保存することができる。異なる抗凝固剤の性能特性に基づいて、適切な抗凝固剤を選択する。実験室でよく使われる抗凝固剤はヘパリンの各種塩、EDTA及びである。
凝固防止の注意点を選択:
①、各サンプルに加えた抗凝固剤の量は一致し、同時に採取した全血の量もできるだけ一致しなければならない。
②、抗凝固全血を集めた後、必ず軽く逆さまにして、十分に抗凝固して、一部の血液が抗凝固剤に接触していないことによる凝固を防止しなければならない。
③、抗凝固全血で収集した血漿は比較的に多い(1 mlの抗凝固全血エネルギーは0.4〜0.5 mlの血漿を分離する)、
④、抗凝集した血漿を冷凍保存した後、解凍時に綿状濁りが発生する可能性があり、あれば遠心分離して濁りを取り除いた後
測定に用いる。
ホルムアルデヒド脱水素酵素(FDH)試験カセットホルムアルデヒド脱水素酵素(FDH)試験カセット微量法微量法
ホルムアルデヒド脱水素酵素(FDH)試験箱ホルムアルデヒド脱水素酵素(FDH)試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
アセトアルデヒド脱水素酵素(ALDH)試験箱アセトアルデヒド脱水素酵素(ALDH)試験箱微量法微量法
アセトアルデヒド脱水素酵素(ALDH)試験箱アセトアルデヒド脱水素酵素(ALDH)試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
補酵素II NADP(H)含有量試験カセット補酵素II NADP(H)含有量試験カセット微量法微量法
補酵素II NADP(H)含有量試験カセット補酵素II NADP(H)含有量試験カセット可視分光光度法可視分光光度法
NADPホスファターゼ(NADPase)試験箱NADPホスファターゼ(NADPase)試験箱微量法微量法
NADPホスファターゼ(NADPase)試験箱NADPホスファターゼ(NADPase)試験箱可視分光光度法可視分光光度法
6リン酸グルコースデヒドロゲナーゼ(G 6 PDH)/グルコース6リン酸デヒドロゲナーゼ試験箱6リン酸グルコースデヒドロゲナーゼ(G 6 PDH)/グルコース6リン酸デヒドロゲナーゼ試験箱微量法微量法
6リン酸グルコース脱水素酵素(G 6 PDH)/グルコース6リン酸脱水素酵素試験箱6リン酸グルコース脱水素酵素(G 6 PDH)/グルコース6リン酸脱水素酵素試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
セルパルプイソクエン酸脱水素酵素(ICDHc)試験ボックスセルパルプイソクエン酸脱水素酵素(ICDHc)試験ボックス微量法
セルパルプイソクエン酸脱水素酵素(ICDHc)試験セルパルプイソクエン酸脱水素酵素(ICDHc)試験セル紫外分光光度法紫外分光光度法
NADPリンゴ酸酵素(NADPME)試験箱NADPリンゴ酸酵素(NADPME)試験箱微量法微量法
NADPリンゴ酸酵素(NADPME)試験箱NADPリンゴ酸酵素(NADPME)試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
NADリンゴ酸酵素(NADME)試験箱NADリンゴ酸酵素(NADME)試験箱微量法微量法
NADリンゴ酸酵素(NADME)試験箱NADリンゴ酸酵素(NADME)試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
6リン酸グルコン酸脱水素酵素(6 PGDH)試験箱6リン酸グルコン酸脱水素酵素(6 PGDH)試験箱微量法微量法
6リン酸グルコン酸脱水素酵素(6 PGDH)試験箱6リン酸グルコン酸脱水素酵素(6 PGDH)試験箱紫外分光光度法紫外分光光度法
クレアチンキナーゼ(CK)試験箱クレアチンキナーゼ(CK)試験箱微量法微量法
phospho−GEFH 1(Ser 886)リン酸化Rhoグアニル酸交換因子2抗体
phospho−AFadin(Ser 1721)リン酸化シルクアクチン結合タンパク質抗体
ARPC 1 Aアクチン関連タンパク質2/3亜型1 A抗体
ANKRD 32アンカタンパク質反復ドメインタンパク質32抗体
ATXN 7 L 3 B共済失調7様蛋白3 B抗体
POP 1感染性蛋白質白1抗体
ASB 5アンカータンパク質含有反復配列−サイトカインシグナル阻害物カセットタンパク質ファミリー5抗体
ABP 1植物成長ホルモンABP 1抗体
phospho−ATF 2(Thr 55)リン酸化活性化複製因子2抗体
ADRA 1 B alpha 1アドレナリン受容体B抗体
Bcl-2 alpha Bcl 2 alphaタンパク質抗体
BAT 5白血球抗原B関連転写タンパク質5抗体
BTBD 1 BTB/POZドメインタンパク質1(C型肝炎ウイルスのNS 5 A逆転写タンパク質8)抗体
BCL 7 B BCL 7 Bタンパク質抗体
補酵素I NAD(H)含有量試験箱可視分光光度法BNC 2塩基性核タンパク質2(亜鉛フィンガータンパク質basonuclin 2)抗体
BCL 7 C B細胞白血病/リンパ腫蛋白7抗体
BSCL 2先天性脂肪代謝障害蛋白2抗体(常染色体優性遺伝痙攣性麻痺17)
BTG 1 B細胞移動遺伝子1抗体
BEAN 1脊髄小脳共済失調タンパク質BEAN 1抗体
注意事項:
1、試薬2は酵素であり、冷凍できず、使用時に氷の上に置く。
2、管理には1本しか必要ありません。
3、照合管に対する吸光値が2より大きい場合、試薬二用蒸留水を7倍希釈して使用することを提案する(10μl試薬二原液+60μl蒸留水)。
4、SODのサンプル測定管の中にはなぜペアの管理管より大きいものがあり、ペアの管理数値はどの範囲にあるのか。
照合管理の範囲は0.8-2です。照射管の吸光値が低すぎるのは(1)試薬2または試薬4が現在配合されていない可能性がある、(2)順番に試薬を添加していない、(3)反応時間が不十分であり、反応時間を延長することができる(反応時間30 minを40 minまで延長することができる)。チューブに対する吸光値が高すぎるのは、試薬2が取扱説明書に従って対応する倍数を希釈していない可能性がある。
測定管が管理管よりも大きい場合は、試料中の不純物の影響が大きすぎる可能性があり、不純物の影響を低減するために一般的に試料抽出上清液を蒸留水または抽出液で10倍希釈して測定すると、通常は測定を正常にすることができる。計算式に対応する希釈倍数を乗算します。