moc 1/moc 2マウス

細胞名： moc 1/moc 2マウス口腔鱗状細胞癌

細胞系統：C57BL/6 Cxcr3-/-

細胞由来：海外

細胞同定：STR検定に合格しました

細胞形態：リンパ母多角形細胞様、壁貼り+懸濁成長

培地：DMEM（NaHCO 3 1.5 g/Lを含む）（BasMed-AW-013）＋FBS 10%＋P/S 1%500 ML。

培養条件：気相空気、95%、二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70～80%

細胞の背景：口腔うろこ状細胞癌（OSCC）は頭頸癌の突出部分集合であり、OSCC発生の主な危険因子は発癌物暴露であり、頭頸癌のこの亜群とヒト腫瘍ウイルス誘導の頭頸癌を区別する。しかし、OSCCの予後は数十年にわたって安定しており、発病率と死亡率の増加を招いている。

細胞用途：科学研究用のみ

注意事項

1. MOC 1細胞は特に活性が高く、付加価値速度が非常に速く、継代密度が大きすぎることは推奨されていないが、薄い重舗装を選択し、80%前後の継代が成長すると、消化が難しくなり、培養箱に置いて消化を行い、時間は約3-4分程度で取り出した

2. MOC 2細胞の壁貼り性は通常の細胞と類似しており、特に強固ではない。増倍周期もMOC 1ほど速くはありません。通常の消化方法で処理する。

3.培養器の側で拍打を行って細胞の脱落を助け、拍打過程は約2分程度続いてやっとほとんどの細胞が脱落し、脱落割合がまだ多くなければ、再び培養箱に戻して1-2分消化を続けた後に再び取り出して拍打脱落を行い、80-90%の細胞が脱落してから消化を中止し、遠心して再び瓶を敷き、均一に分散することができる。

常温出荷

受信後T 25本の消毒後、培養箱を2 ~ 3時間静置した後、密度と状態を観察して2 ~ 3枚撮影して販売にフィードバックし、密度が基準を達成すれば継代できる。前期継代比1：2、再次長が後継代に満杯になると、1本を1個の1 mlの凍結保存管に凍結保存することを提案し、もう1本は継代を続け、2-3本を繰り返し凍結保存してから実験を拡大し、突発的な状況による断種を防止する。

ドライアイス出荷

通常の細胞出荷凍結保存管2匹、回復1匹、もう1匹は予備で、回復が成功しなかった場合はメーカーの要求に厳格に従って2番目に回復し、いずれも回復が成功しなかった場合は即時に回復写真を残して知らせてくれた。

壁細胞

1. 培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBS細胞を1〜2回潤洗した。

2. 加入0.25%（w/v）T 75瓶2−3 mL）を37℃の培養箱に入れて1−2分間消化する（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、

その後、顕微鏡下で細胞の消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなって脱落したら、速やかに操作台に戻し、培養瓶を軽く叩いてから添加する消化を停止するために10%FBS含有培地3〜4 ml。

３. 軽く泡立てて吸い出し、1000 RPM条件下で3-5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、均等に吹き付けた。細胞懸濁液を1：2の割合で新T 25本/6 cmシャーレに分け、その後の継代は実際の状況に応じて1：2 ~ 1：5の割合で行った。

4. 細胞凍結保存：細胞を受け取った後、前3世代を培養する際に、後続の実験に備えて細胞種子を凍結保存することを提案した。

５. 輸送用培地（灌液培地）これ以上細胞の培養に使用することはできません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製された培地と交換して細胞を培養してください。

懸濁細胞

懸濁状態で成長した細胞は、培養ビンに培地を添加することで細胞の成長状態を維持することができ、一般的には細胞密度は1×10エルビウム〜1×10エルビウム／mL（細胞によって密度要件が異なる）は細胞の正常な成長を維持することができる。フラスコを必要とする場合は、細胞懸濁液を遠心管中の1000 rpm、5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混合した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25フラスコに分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新培地を添加して細胞の生長活力を維持し、後続継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:4の割合で行う。

バイオセーフティ

1. すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があるとみなされ、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから廃棄できるように注意してください。

2. 凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。