SU-DHL-10ヒトB細胞リンパ腫細胞

SU-DHL-10ヒトB細胞リンパ腫細胞

当社のすべての製品は科学実験のみで、他の科学実験以外の使用はしません！

商品の詳細：

種属源：人

性別年齢：25歳、男性

成長特性：懸濁塊成長

細胞形態：リンパ球様

細胞規格：1 x 106cells/T25または1ミリリットルとうけつトラップ

培養条件：RPMI-1640 中間+10% 胎児牛血清37℃CO2の5%

凍結保存条件：90%のFBS+10%のDMSO

継代方法：1:3継代, 2-3天伝1代

細胞培養操作：

1）蘇生細胞：以下の細胞培養凍結保存処理は参考に供するだけであり、具体的な操作手順は商品取扱説明書を主とする。

細胞懸濁液1 mLを含む凍結保存管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、培地4 mLを加えて均一に混合した。1000 rpm条件下で3分間遠心分離し、上澄み液を捨て、培地を1〜2 mL加えた後、均質に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を適量の培地を含むフラスコに加えて一晩培養する（または細胞懸濁液を6 cm皿に加え、約4 mLの培地を加え、一晩培養する）。3日目に液を交換し、細胞密度を検査した。

2）細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。

a、培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

b、消化液1 mL（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）を培養瓶に加え、消化液をすべての細胞に浸潤させ、培養瓶を37℃培養箱に置いて1-3 min消化した（細胞消化の状況に応じて）、顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなって脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、2-3 ml培地を加えて消化を停止した。軽く均等にしてから無菌遠心管に入れ、1000 rpmで5 min遠心し、上澄み液を捨て、培養液1-2 mLを補充してから均等に吹き付ける。

c、細胞懸濁液を新しい8 mL培地を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分け、培養箱に入れて培養した。

3）細胞凍結保存：細胞の成長状態が良好な場合、細胞凍結保存を行うことができる。次のT 25本を例に挙げます。

a、細胞及び細胞培養液を収集し、無菌遠心管に入れ、1000 rpm条件下で4分間遠心し、上澄み液を捨て、PBSで一回洗浄し、PBSを捨て、細胞計数を行った。

b、細胞数に応じて無血清細胞凍結保存液を加え、細胞密度5×106 ~ 1×107/mLを軽く混合し、凍結保存管ごとに1 mLの細胞懸濁液を凍結保存し、凍結保存管に注意して標識をしっかりと行う。

c、凍結貯蔵管を−80℃の冷蔵庫に入れ、24時間後に液体窒素灌漑貯蔵に移した。次回取り出すために、チューブの凍結位置を記録します。

細胞培養に関する考慮事項：

一、細胞を受け取ったら、まず細胞瓶が完全かどうか、培養液の液漏れ、濁りなどの現象があるかどうかを観察し、もし上記の現象が発生したら、直ちに私たちに連絡してください。

二、細胞の説明書をよく読み、細胞の形態、使用する培地、血清の割合、必要な細胞因子などの細胞関連情報を理解し、細胞培養条件の一致を確保し、培養条件の不一致により細胞に問題が発生した場合、責任は顧客自身が負う。

三、75%アルコールで細胞瓶の表面を拭き、顕微鏡下で細胞状態を観察した。輸送問題のため、一部の細胞は温度変化と激しい衝突により破砕して破片を形成し、正常な現象である。細胞状態を観察した後、75%アルコール消毒瓶壁はT 25瓶を37℃培養箱に2〜4時間置いた。

四、壁貼り細胞は消化でき、懸濁細胞は直接混合して細胞を収集し、900 rpm-1000 rpmは3分間遠心分離し、上清を捨てる。PBS再懸濁細胞5 mLを加え、さらに900 rpm-1000 rpmで3分間遠心分離し、新鮮な培地で細胞を再懸濁し、新しい培養瓶または培養皿に接種し、培養箱に入れて培養した。

五、お客様は、同じ条件の培地を細胞培養に使用してください。

六、 お客様は細胞を受け取ってから3日前にそれぞれ何枚かの細胞写真を撮り、細胞状態を記録し、我が社の技術部とのコミュニケーションを容易にすることを提案します。輸送の原因で、個別の敏感細胞に不安定な状況が発生することがあります。直ちに私たちに連絡して、細胞の具体的な状況を知らせて、私たちの技術者が問題が解決するまで訪問を追跡するために。

七、この細胞は科学研究用にしか使用されていない。

八、備考：輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製した培地と交換して細胞を培養してください。細胞を受け取った後の最初の継代提案1：2継代。

九、注意：1：2継代は1つのT 25瓶を2つのT 25瓶または2つの6 cm皿に渡すことです。1つのT 25瓶に2つの10 cm皿を渡すのではありません。

会社が販売している製品：

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