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3004965510@qq.com
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上海市閔行区碧泉路36弄銀宵ビル
上海邦景実業有限公司
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ペプシン乳酸脱水素酵素(LDH)活性微量法測定の原理測定によるものLDH触媒ピルビン酸を乳酸に還元する過程でNADHの生成量を間接的に測定するLDHの活性化を図ることができる。
具体的な手順は次のとおりです。
鄒反応原理:にLDHの作用の下で、NAD+復元された生成NADH。NADHとWST-8相互作用により色が発生し、比色測定(λ最大=450 nm)。
鄒反応条件鄒:LDH将(しょう)NADに戻すNADH,NADHとWST-8相互作用により色が生成されます。この反応は氷の上で光を避けて行われ、各成分(例えばアッセイバッファー、ラクテート、NAD、WST-8、エンハンサー)実験前に冷蔵庫から取り出して室温に平衡させる必要があり、全過程で遮光操作が必要である。
鄒吸光度測定鄒:に450nm波長における吸光度の測定、吸光度とLDH活性は比例し、比色法により測定することができるLDHの活性化
実験手順と必要な設備:
実験手順:作動液の準備(1×アッセイバッファー、NAD、WST-8、エンハンサー和ラクテート均一に混合)し、作動液を添加する96オリフィスプレートまたは微量ガラス比色皿に、測定すべきサンプルを加え、37℃で一定時間恒温培養した後、吸光度を測定した。
必要なデバイス:酵素スケールまたは可視分光光度計(エネルギー測定)450nmにおける吸光度)、恒温タンク、製氷機、低温遠心機、96オリフィスプレートまたは微量ガラス比色皿、調整可能ピペットおよびガンヘッド、脱イオン水、ホモジナイザー(組織サンプルの場合)
実験上の考慮事項:
試薬保存:各成分(例えばアッセイバッファー、ラクテート、NAD、WST-8、エンハンサー)氷の上で光を避けて保存し、繰り返し凍結融解を避ける必要がある。
‑操作上の注意事項‑:全体の実験過程は氷の上で光を避けて行い、光が結果に影響を与えないようにする必要がある。