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メール
shxysw02@163.com
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電話番号
15221858802,13816899465
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アドレス
上海市松江区売新道路2077号（新九広場）3階8306室
上海信裕生物科学技術有限公司
概要
細胞基本属性$r$n細胞名VMRC-LCDヒト非小細胞肺癌細胞$r$n細胞別称VMRC-LCD$r$n商品番号XY-H 1034$r$n種属由来ヒト$r$n組織由来肺$r$n成長特性壁貼り成長$r$n細胞形態上皮細胞様$r$n細胞仕様1#215;10 ^ 6 cells/T 25培養瓶または1 mL凍結保存管包装$r$n培地RPMI 1640+10%fe
製品詳細
VMRC-LCDヒト非小細胞肺癌細胞
一、細胞基本属性 | |
細胞名 |
VMRC-LCDヒト非小細胞肺癌細胞 |
細胞別称 |
VMRC-LCD型 |
商品番号 |
XY-H1034型 |
ジェネリックソース |
人 |
年齢性別 |
- |
組織ソース |
肺 |
せいちょうとくせい |
はりつけせいちょう |
細胞形態 |
上皮細胞様 |
背景の概要 |
- |
生物安全等級 |
- |
さいぼうきかく |
1×10 ^ 6 cells/T 25培養瓶または1 mL凍結保存管包装 |
マイコプラズマ検出 |
無 |
培地 |
RPMI1640 +10%胎児牛血清+1%P/S |
培養条件 |
気相：95%空気+5%二酸化炭素温度：37℃ |
とうけつじょうけん |
無血清凍結貯留液、液体窒素貯留 |
ぞうばいじかん |
~24-30時間 |
二、細胞受容後の処理
1)細胞を受け取った後、75%アルコール消毒瓶の壁はT 25瓶を室温に置いて約1時間放置し、培養瓶の破損、液の溢れ及び細胞の汚染が発見された場合、写真を撮った後、直ちに連絡してください。
2)アフターサービス時の細胞状態の根拠として、4または5 X顕微鏡下で細胞状態を確認するとともに、受け取ったばかりの細胞の写真（10×、20×）を各2～3枚および培養瓶の外観写真1枚ずつ保存してください。
3)壁貼り細胞：細胞は室温で1 h放置し、顕微鏡下で細胞の成長と壁貼りを観察し、一部の壁貼り細胞は宅配輸送中に振動により脱落し、脱落して塊になることがある。鏡下観察細胞の成長密度が60%以下であれば、培養瓶中の灌液培地を除去し（壁に貼られていない細胞があれば遠心回収し、元培養瓶に再懸濁して打ち込む）、新たに調製した丸全培地6-8 mLを加え、細胞培養箱に入れて培養を続けることができる。細胞成長密度が70〜80%以上に達すると、細胞を継代処理することができる。継代過程で輸送振動により脱落した細胞は遠心回収が必要である。
4)細胞輸送途中の脱落操作方法：脱落した細胞を遠心分離してから上清を捨て、PBSで一遍洗浄し、遠心分離して上清を捨て、遠心管に1 mlの酵素を加えて20秒程度吹き散らし消化し、加丸全（ぜん）培地の消化が終了した後、遠心分離して再舗装し、残りの壁貼り細胞は正常な壁貼り細胞の継代方法に従って操作される。
5)備考：輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製したものと交換してください丸全（ぜん）培地で細胞を培養する。細胞を受け取った後、最初の継代提案T 25培養瓶1：2継代。
三、細細胞培養操作
1) 蘇生細胞：以下の細胞培養凍結保存処理は参考に供するだけで、具体的な操作手順は商品取扱説明書を主とする
を含む1ミリリットル細胞懸濁液の凍結貯蔵管は 37℃水浴中に急速に揺れて解凍し、加えて4 ミリリットル培地は均一に混合されている。に1000回転分条件付き遠心分離3分、上澄み液を捨てる、加える1〜2mL培地後に均等に吹き付ける。その後、すべての細胞懸濁液を適量の培地を含むフラスコに加えて一晩培養する（または細胞懸濁液を加えて6センチメートル皿に、約4 ミリリットル丸全（ぜん）培地、一晩培養)。3日目に液を交換し、細胞密度を検査した。
2）細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。
a)培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBS潤洗細胞1-2回。
b）加1ミリリットル消化液（0.25%トリプシン-0.02%EDTA）培養瓶に入れ、消化液をすべての細胞に浸潤させ、培養瓶を37℃培養箱での消化1〜3分（細胞の消化状況に応じて）、そして顕微鏡下で細胞の消化状況を観察し、もし細胞の大部分が丸くなって脱落したら、迅速に操作台に戻し、培養瓶を軽くたたいてから加える2〜3ml丸全（ぜん）培地は消化を停止する。
c）軽く均等にして無菌遠心管に入れ、1000回転分遠心分離5分、上澄み液を捨て、補充する1〜2mL培養液の後に均等に吹き付ける。
d)細胞懸濁液を1:2スケールを新規に含める8ミリリットル培地の新しい皿または瓶の中で、培養箱に入れて培養する。
壁細胞継代の注意点：
l必ずPBSひと洗いする。
l細胞は何度も観察して時間を把握し、細胞が基本的に脱落しないうちに消化を中止して吹き落とさないようにして、細胞は 分化しやすくなり、死亡しやすくなります。
l細胞に吹きつけてばかりいてはいけない
3) 細胞凍結保存：細胞の成長状態が良好な場合、細胞凍結保存を行うことができる。下T25本を例に、
a)細胞及び細胞培養液を収集する、無菌遠心管に入れ、1000回転分条件付き遠心分離4分、上澄み液を捨て、PBS一度洗って捨ててPBSを選択し、細胞計数を行った。
b）細胞数に応じて無血清細胞凍結貯留液を加え、細胞密度1×10^6~1×10^7／mL、軽く混ぜて、各凍結保存管は凍結保存する1mL細胞懸濁液、凍結保存管に注意して標識をしっかりと行う。
c）凍結貯蔵管を入れる-80℃冷蔵庫、24時間後に液体窒素灌漑貯蔵に移る。次回取り出すために、チューブの凍結位置を記録します。
四、育成上の注意事項
1)細胞に問題が発生し、再発する場合
a)細胞輸送途中に遭遇した各種問題、細胞の紛失、瓶体の破損、培養液の深刻な液漏れなど、再発、
b）細胞汚染問題は、製品を受け取ってから3日以内に、真実な実験結果を提出して、確認してから再発してください。
c）常温で出荷した細胞を2時間静置した後、ドライアイス凍結保存して出荷した細胞が回復した2日後、ほとんどの細胞は生存していない（実際にはっきりした細胞状態写真を提供する必要がある）、再送、
d)ドライアイス凍結保存出荷された細胞が回復した2日後または常温出荷された細胞は2時間静置され、開封されず、汚染、再発、
e)細胞活性の問題は、製品を受け取ってから7日以内に私たちに真実な実験結果を提出してください。
f)細胞を受け取った日及び2、3日目に写真を撮ってください。3日以内に告知されていない場合は、製品が合格したとみなします。4-7日以内に問題が発生した場合、細胞を受け取る3日前の写真と細胞に問題が発生した写真及び細胞に関する操作の詳細なステップを提供し、技術者とコミュニケーションする必要がある場合、技術者が当方の責任と判断した場合、再送する。
2)細胞に問題が生じ、再発しない場合
a)顧客の操作は細胞汚染をもたらし、再発しない、
b）お客様の深刻な操作ミスにより細胞の状態が悪く、再発しない、
c）非私たちは細胞培養系による細胞状態が悪く、再発しないことを推奨しています。
d)細胞状態が悪く、実際に明らかな培養3日前の細胞状態写真を提供しておらず、再送していない、
e)細胞培養時に他の処理を経て細胞に問題が発生した場合、再発しない、
f)細胞を受け取り、問題を発見してカスタマーサービススタッフとコミュニケーションする時間が7日より大きいことを証明し、再発しない、
g)具体的な状況に応じて決定する
五、注意事項
1. すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があるとみなされ、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから廃棄できるように注意してください。
2. 凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。
3. この細胞は科学研究用にしか使われていない！説明書は参考にして実際の入荷説明書を基準にしてください！
