293 HEK-293（ヒト胚腎細胞）

293 HEK-293（ヒト胚腎細胞）

別称ヘック293 ;HEK-293；賀293 ;赫：293、293;293ヘクタールヒト胚性腎293

培養プログラムA（デフォルト）

成長培地：

MEM（ATCC改良）＋10%FBS＋1%P/S

培養条件：

気相：空気、95%CO2，5%、温度：37℃

注意事項この細胞は壁に張り付いて緩んでおり、操作時はできるだけ柔らかくしてください。液交換時に培地を予熱する必要がある、受入に大きな塊が脱落した細胞塊があれば、正常な現象であり、受入注意事項に従って処理してください。

参考資料（出所文献）

背景説明は、ヒトアデノウイルス5（Ad 5）をせん断してトランスフェクションしたヒト胚腎細胞から形成された永生化細胞であり、トランスフェクションしたAd 5遺伝子を含み発現する。初期の報告では、ゲノムにアデノウイルス5（Ad 5）ゲノムの左側端と右側端のDNAが含まれていたが、現在ではその左側端のDNAだけが存在することが明らかになった。Ad 5の挿入点のクローン配列決定により、Ad 5の1〜4344位の線形ヌクレオチドが19番染色体（19 q 13.2）に統合されることが分かった。ヒトアデノウイルスベクターの増幅宿主のために、異常なボビン受容体を発現することができる細胞表面受容体は、整合体β1サブユニットとボビン受容体α−vサブユニットからなる。

年齢（性別）胎児

組織ソース腎臓アデノウイルス5 DNAによる形質転換

細胞型形質転換細胞系

生物安全等級BSL-2

ぞうばいじかん〜24〜30時間

こぶ形成性はい、裸のマウスでははははははい。

受容体発現状況ビトロネクチン

ほぞんきこうATCC;CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602

細胞処理：

1）凍結保存細胞の回復：1 mLの細胞懸濁液を含む凍結保存管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、4-6 mLの培地を含む遠心管に加えて均一に混合する。1000 RPM条件下で3〜5分間遠心分離し、上清を捨て、培地に細胞を再懸濁した。次いで、細胞懸濁液を6〜8 mlの培地を含む培養瓶（または皿）に加え、37℃で一晩培養した。翌日の顕微鏡下で細胞成長状況と細胞密度を観察した。

2）細胞継代：細胞密度が70〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。この細胞は懸濁および軽微な壁貼り細胞であり、継代は以下の方法を参照することができる：

1、収集：培養ビン中の懸濁した細胞を遠心管に収集する。カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回洗浄した。細胞壁が堅固でないPBSは洗浄後に細胞が脱落するため、PBSも遠心管に回収しなければならない。

2、0.25%（w/v）0.53 mM EDTAを培養瓶（T 25瓶1-2 mL、T 75瓶2-3 mL）に入れて37℃培養箱で1-2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり、脱落したら速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、3-4 mlの10%FBS含有培地を加えて消化を停止した。

3、収集した懸濁細胞、pbs洗浄液中の細胞と消化した壁貼り細胞を1000 rpmlで5分間遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混和した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25瓶に分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新しい培地を添加して細胞の成長活力を維持し、後続継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:5の割合で行った。

3）細胞凍結保存：細胞を受け取った後、前3世代の培養時に細胞種子を凍結保存し、後続の実験に備えることを提案する。次のT 25本を例に挙げます。

1、細胞凍結保存時に細胞継代の過程に従って消化した細胞を遠心管に収集し、血球計数板を用いて計数し、細胞の凍結保存密度を決定することができる。一般細胞の推奨凍結保存密度は1×10 8310 ~ 1×10 8311個の生細胞/mlであった。

2、1000 rpmは3-5 min遠心分離し、上清を取り除く。調製した細胞凍結貯留液を用いて細胞を再懸濁し、1 mlの凍結貯留液に1×10 ~ 1×10個の生細胞/mlを1つの凍結貯留管に含有して細胞を凍結貯留管に分配し、名称、代数、日付などの情報を表示した。

3、凍結保存する細胞をプログラム冷却ボックスに入れ、−80度冷蔵庫で一晩置き、その後液体窒素容器に移して保存する。同時に液体窒素容器内の凍結貯蔵管の位置を記録して、後続の調査と使用のために。

操作手順：

ステップ1：冷蔵庫から無血清非プログラム凍結保存液を取り出し、使用を待つ

ステップ2：対数成長期の細胞を遠心的に収集する（壁貼り細胞消化下遠心、懸濁細胞直接遠心、回転速度1200 rpmまたは250 g、時間3 min）

ステップ3：上清を捨て、適量の無血清非プログラム凍結保存液を添加し、細胞を再懸濁する

手順4：1 ~ 1.5 mL/管の量に従って凍結貯蔵管に分注し、管蓋を締め、標識を付ける

ステップ5：凍結保存管を直接−80℃冷蔵庫に移し、24時間後に液体窒素長期保存に移す

凍結タンクがない場合や非プログラム凍結貯留液がない場合は、手動勾配冷却を選択することができます。しかし、手動勾配降温はすべての細胞に適用されず、効果が不安定で、同様にまず凍結保存試験を行う必要がある。

注意事項：

1、細胞を受け取った後、ドライアイスがきれいに揮発し、凍結保存管のキャップが脱落し、破損し、細胞が汚染されていることを発見したら、すぐに私たちに連絡してください。

2、受け取った細胞はまず瓶の蓋を開けず、瓶体はアルコールを拭いた後、培養箱に2-4時間静置し（細胞密度に応じて）細胞状態を安定させる。次に、逆さま顕微鏡下で細胞の成長状況を観察し、細胞に対して異なる倍数写真を撮影し（細胞を収める時に全体の外観について1枚の写真を撮ることを提案し、培地の色と液漏れがあるかどうかを観察し、その後、顕微鏡下で細胞状態、100*、200*各1枚を撮影し）、記録細胞が輸送中に汚染されているかどうかを観察した。当方の販売根拠として。

3、細胞状態は環境、操作と輸送などの多方面の要素の影響を受けているため、当社は顧客が細胞を受け取ってから1週間以内の細胞状態を保証するだけで、顧客はアフターサービスを必要とする時、細胞を受け取った時間証明及び顧客が商品を受け取る時間と問題を発見した後の顧客とのコミュニケーションの時間証明を提示する必要があり、期間間隔時間は7日を超えてはならない。

4、すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。
会社が販売している製品：

マウス骨格筋線維芽細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス神経過少突起コロイド前駆体細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット神経少突起コロイド前駆体細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス骨髄造血幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット気管軟骨細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス歯肉線維芽細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット末梢血リンパ球5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス腸間膜平滑筋細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット頸動脈血管平滑筋細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス真毛皮乳頭細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット胚肢芽間葉性幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウスポケニン細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット脊髄神経幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス胚性幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット三叉ニューロン細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス網膜微小血管周細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット歯髄幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス骨髄単一核細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット陰茎白膜線維芽細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス三叉ニューロン細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット嗅球細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス膣壁線維芽細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット寛骨臼軟骨細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

293 HEK-293（ヒト胚腎細胞） マウス腓腹筋細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラットポケニン細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

マウス強膜線維芽細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル

ラット胚性幹細胞5×10エルビウムCells/T 25培養ボトル