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CRISPR/Cas 12 aシステム実験サービス

交渉可能更新03/04
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概要
CRISPR/Cas 12 aシステム実験サービス:CRISPR/Cas 12 a(旧称Cpf 1)はClass 2 Type V型CRISPRシステムに属し、侵入したウイルスやプラスミドDNAを識別し切断するための細菌と古菌の適応性免疫機構である。Cas 9と比較して、そのdu特の動作モードは遺伝子編集、分子検出及び多遺伝子制御において顕著な優位性を示す。
製品詳細

一、CRISPR/Cas 12 aシステム実験サービスシステム定義と生物学的起源

CRISPR/Cas12aについて(原称Cpf1)に属するClass 2 Type V型CRISPRシステムは、侵入したウイルスやプラスミドDNAを識別し切断するための細菌と古菌の適応性免疫機構である。Cas 9と比較して、そのdu特の動作モードは遺伝子編集、分子検出及び多遺伝子制御において顕著な優位性を示す。


二、CRISPR/Cas 12 aシステム実験サービスコア分子機構と技術特性

(一)作用フロー

(二)重要特性比較(Cas 12 a vs Cas 9)

パラメータ CRISPR/Cas12aについて CRISPR/Cas9について
蛋白質の大きさ 1200~1300アミノ酸(より小さい) 1000~1600アミノ酸
RNA依存 のみcrRNA の(traccrRNAなし) crRNA + トラックRNAまたはsgRNAの嵌合
crRNA加工 自律RNase活性(組み込み加工能力) 依存性宿主RNase IIIとtracRNA
切断終端タイプ 黏性末端(5' 突出) フラットエンド
PAM識別シーケンス 5'-TTTN/TTTV-3'(Tリッチ) 5'-NGG-3'(Gリッチ)
ヌクレアーゼドメイン シングルRuvCドメイン HNH+RuvCデュアルドメイン
トランスカット活性 有(非特異的切断可能ssDNA)

  • VA/C/G(非T)、例えば5'-TTTA/TTC/TTG-3'。

  • 黏性末端アイソトープ再構築修復(HDR)をより容易にトリガし、正確な編集効率を向上させる。


三、優勢と応用シーン

(一)技術優勢

  1. 多遺伝子編集の効率性

    • 単一のcrRNAアレイは同時に複数の遺伝子を標的にすることができ、traccrRNAを繰り返し構築する必要はなく、複雑な経路制御に適している。

  2. AT濃縮ゲノム適合性

    • ATに富むゲノム(植物、寄生虫など)の編集効率はCas 9より顕著に高かった。

  3. 低標的離脱リスク

    • PAM活性に厳密に依存し、トランスカット活性は閉じられ、全ゲノム脱標的率はCas 9より低い。

  4. 配信の利便性

    • 蛋白質はより小さく、AAVなどのウイルスベクターに包装しやすく、体内遺伝子治療に適している。

(二)コア応用分野

適用方向 ケース 優位性の体現
たいでんしノックアウト トウモロコシ中で3つの干ばつ耐性遺伝子を同時編集、編集効率>60% crRNAアレイのシンプルな設計
せいみついでんしそうにゅう 粘性末端増強HDRを用いて、ヒト由来FIX凝血yin子遺伝子の定点修復を実現する ハイファイ修復
ぶんししんだん トランスカット活性と結合した核酸検出(CRISPR-DETECT)の開発 高感度、PCR増幅不要
抗ウイルス研究 カイコからBmNPVウイルス受容体遺伝子を編集、抗ウイルス効率はCas 9より40%向上 効率的なAT濃縮ゾーンの切断
遺伝子治療ベクターの最適化 Cas 12 b(より小さな変異体)の脱標的率はCas 9より50%低下し、臨床に適している 高セキュリティ配信