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CRISPR/Cas 12 bシステム実験

交渉可能更新03/04
モデル
製造者の性質
プロデューサー
製品カテゴリー
原産地
概要
CRISPR/Cas 12 bシステム実験:CRISPR/Cas 12 b(旧称C 2 c 1)はClass 2 Type V-B型CRISPRシステムに属し、Cas 9とCas 12 aに続く重要な遺伝子編集ツールである。
製品詳細

一、分子機構と構造特性

(一)システム定義と分類

CRISPR/Cas12bについて(原称C2c1)に属するClass 2 Type V-B型CRISPRシステムCas 9とCas 12 aに続く重要な遺伝子編集ツールである。主な特徴は次のとおりです。

  1. 二重RNAブート機構

    • 必要crRNA のトラックRNA(sgRNAに融合可能)ターゲット切断を共にガイドし、Cas 9とCas 12 aの部分特性を兼ね備えている。

  2. 切断モード

    • シングルRuvCドメイン二本鎖DNAを切断し、形成する5−6 ntの粘性末端(5′突出)、相同組換え修復(HDR)に有利である。

  3. PAM識別

    • 依存T-rich PAMシーケンス(例えば5'-TN-3')、AT濃縮ゲノムの編集能力を拡張した。

(二)構造優勢

特性 キャス12b 比較Cas 9/Cas 12 a
蛋白質の大きさ 約1100アミノ酸(最小) Cas 9(1600 aa)およびCas 12 a(1300 aa)よりも小さい
RNA要件 crRNA+traccrRNA(sgRNAに融合可能)が必要 Cas 12 a(crRNAのみ)より複雑だが、Cas 9より簡略化されている
熱安定性 おんどかんどがた(40~55℃活性化) 哺乳類細胞に適合するための工学的改造が必要

二、技術優勢と性能

(一)コア優勢

  1. ていだつひょうりつ

    • GUIDE-seq検出による脱ターゲット率Cas 9より顕著に低い(エラー挿入/欠落の減少>50%)。

  2. 高特異性

    • crRNA誘導配列はより長く(>42 nt)、標的精度はより高い。

  3. 編集モード

    • ゆうどう純挿入突然変異率が低い、より小さなフラグメント欠損を生じさせ、機能の予測不可能性を減少させる傾向がある。

  4. ウイルスベクター適合性

    • 小分子量の方が包装しやすいAAVまたはスローウイルスベクター、体内送達効率を向上させる。

(二)同類システムとの比較

パラメータ キャス12b キャス9 カス12a
PAMシーケンス 5'-TN-3'(T富化) 5'-NGG-3'(G富化) 5'-TTTV-3'(T富化)
切断端 黏性末端(5' 突出) フラットエンド 黏性末端(5' 突出)
トランスカット活性 ❌ 無 ❌ 無 ✅ 有(切断可能ssDNA)
多遺伝子編集 複数sgRNAが必要 複数sgRNAが必要 ✅ crRNAアレイのサポート

:Cas 12 bカットモードで遺伝子治療に新たなエピトープの発生を回避し、免疫リスクを下げる。


三、応用シーンと最前線事例

(一)生物医学の応用

  1. 抗ウイルス治療

    • HIV:T細胞中の単回編集で全伝染性HIVを除去でき、効率はCas 9より優れている。

  2. 遺伝病の修復

    • 連合HDRパス実装β-地中海貧血遺伝子の正確な修復、ヘモグロビンは正常レベルに回復した。

  3. 腫瘍免疫

    • 編集PD-1/CTLA-4デュアルターゲット、CAR-T細胞枯渇を低減する。