-
メール
yilaibo@shyilaibo.com
-
電話番号
15221734409
-
アドレス
上海市宝山区長江南路180号B区B 650
イレボバイオテクノロジー(上海)有限公司
yilaibo@shyilaibo.com
15221734409
上海市宝山区長江南路180号B区B 650
CRISPR/Cas12bについて(原称C2c1)に属するClass 2 Type V-B型CRISPRシステムCas 9とCas 12 aに続く重要な遺伝子編集ツールである。主な特徴は次のとおりです。
二重RNAブート機構:
必要crRNA のとトラックRNA(sgRNAに融合可能)ターゲット切断を共にガイドし、Cas 9とCas 12 aの部分特性を兼ね備えている。
切断モード:
シングルRuvCドメイン二本鎖DNAを切断し、形成する5−6 ntの粘性末端(5′突出)、相同組換え修復(HDR)に有利である。
PAM識別:
依存T-rich PAMシーケンス(例えば5'-TN-3')、AT濃縮ゲノムの編集能力を拡張した。
| 特性 | キャス12b | 比較Cas 9/Cas 12 a |
|---|---|---|
| 蛋白質の大きさ | 約1100アミノ酸(最小) | Cas 9(1600 aa)およびCas 12 a(1300 aa)よりも小さい |
| RNA要件 | crRNA+traccrRNA(sgRNAに融合可能)が必要 | Cas 12 a(crRNAのみ)より複雑だが、Cas 9より簡略化されている |
| 熱安定性 | おんどかんどがた(40~55℃活性化) | 哺乳類細胞に適合するための工学的改造が必要 |
ていだつひょうりつ:
GUIDE-seq検出による脱ターゲット率Cas 9より顕著に低い(エラー挿入/欠落の減少>50%)。
高特異性:
crRNA誘導配列はより長く(>42 nt)、標的精度はより高い。
編集モード:
ゆうどう純挿入突然変異率が低い、より小さなフラグメント欠損を生じさせ、機能の予測不可能性を減少させる傾向がある。
ウイルスベクター適合性:
小分子量の方が包装しやすいAAVまたはスローウイルスベクター、体内送達効率を向上させる。
| パラメータ | キャス12b | キャス9 | カス12a |
|---|---|---|---|
| PAMシーケンス | 5'-TN-3'(T富化) | 5'-NGG-3'(G富化) | 5'-TTTV-3'(T富化) |
| 切断端 | 黏性末端(5' 突出) | フラットエンド | 黏性末端(5' 突出) |
| トランスカット活性 | ❌ 無 | ❌ 無 | ✅ 有(切断可能ssDNA) |
| 多遺伝子編集 | 複数sgRNAが必要 | 複数sgRNAが必要 | ✅ crRNAアレイのサポート |
注:Cas 12 bカットモードで遺伝子治療に新たなエピトープの発生を回避し、免疫リスクを下げる。
抗ウイルス治療:
HIV:T細胞中の単回編集で全伝染性HIVを除去でき、効率はCas 9より優れている。
遺伝病の修復:
連合HDRパス実装β-地中海貧血遺伝子の正確な修復、ヘモグロビンは正常レベルに回復した。
腫瘍免疫:
編集PD-1/CTLA-4デュアルターゲット、CAR-T細胞枯渇を低減する。